Peptide revient souvent en discussion, rarement avec le contexte. Voici d'abord les bases, puis les considérations pratiques.
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=== Test d'activation des monocytes === Le test d'activation des monocytes (MAT) utilise les monocytes dans le sang humain in vitro pour détecter des pyrogènes. Il a été ajouté à la pharmacopée européenne en 2010 et accepté par la FDA en 2012.
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== Élimination des pyrogènes (dépyrogénation) == Les pyrogènes peuvent souvent être difficiles à éliminer de la solution en raison de la grande variabilité de poids moléculaire. Les pyrogènes sont également relativement stables thermiquement et insensibles aux changements de pH. Cependant, plusieurs techniques d'élimination existent [2] . Chromatographie par échange d'ions Les endotoxines sont chargées négativement et vont se lier à un échangeur d'anions. Si la substance cible n'est pas également chargée négativement, elle passera dans la colonne avant l'endotoxine et une séparation efficace peut être réalisée. Cette méthode est parfois utilisée dans la purification des albumines (détails ci-dessous). Des ligands d'affinité connue pour les endotoxines peuvent être couplés à un système d'échange d'anions pour augmenter sa force de liaison aux endotoxines et améliorer encore la pureté du produit final. Des exemples typiques de ligands de liaison aux endotoxines comprennent l'histamine, des composés hétérocycliques contenant de l'azote et la polymyxine B. Cependant, il est connu que la polymyxine B induit la production d'interleukine-1, un pyrogène exogène, et il doit donc être démontré qu'elle est absente du produit final. Exemple d'utilisation de la chromatographie par échange d'anions pour purifier l'albumine (Uppsala):
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2% de l'endotoxine ne se lie pas à la colonne. Toutefois, ces 2% sont éliminés avant le pic d’albumine et peuvent donc être éliminés simplement en commençant la collecte après l’élimination de ces 2%. 10% de l'endotoxine qui ne se lie à la colonne (9,8% du total d'origine) finira par se laver après le pic de l' albumine. Pour éviter de contaminer le produit final, on arrête sa collecte avant que cela ne se produise. Les 90% restants de l'endotoxine liée (88,2% du total initial) doivent être nettoyés de la colonne à l'aide de NaOH. Une alternative à l'échange d'anions est la chromatographie par échange de cations, dans laquelle des solutés chargés positivement se lient au support chromatographique solide. Dans cette méthode, la cible se lie à la colonne au lieu de l'endotoxine. L'endotoxine est ensuite lavée à travers la colonne et une cible pure est ensuite éluée de la colonne. Il a été démontré que la chromatographie par échange de cations purifie efficacement le β-interféron. (Dembinski et al.) Ultrafiltration Étant donné que le poids moléculaire des endotoxines est généralement supérieur à 10 kD, l’ultrafiltration peut parfois être utilisée pour effectuer une séparation en fonction de la taille. En raison de la grande variabilité de la taille des endotoxines, il peut être difficile de sélectionner la membrane appropriée. Cette méthode est donc mieux utilisée uniquement lorsque toutes les endotoxines présentes sont supérieures à 300 000 Da.
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Il a été démontré que des ultra-filtres disponibles dans le commerce peuvent éliminer les pyrogènes à un niveau inférieur à 0,001 UE/ml. Distillation Cette méthode est également basée sur le poids moléculaire élevé et la stabilité à la chaleur des endotoxines. Les solvants de bas poids moléculaire peuvent être facilement purifiés en faisant bouillir et en recueillant la vapeur condensée dans un récipient exempt d'endotoxines (voir "chauffage" ci-dessous). Les grosses molécules de LPS ne se vaporisent pas facilement et restent donc dans le récipient de chauffage. C'est la méthode de choix pour la purification de l'eau.
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Peptide est résumé ici à partir de littérature publique : définition, contexte et points récurrents en pratique. Informations générales, pas un avis médical.
La recherche sur Peptide repose surtout sur des travaux de laboratoire et des modèles animaux ; les données cliniques varient selon la substance.
La pureté et l'analyse (HPLC, spectrométrie de masse), une reconstitution correcte et un stockage adapté sont déterminants.%!(EXTRA string=Peptide)
Tous les mécanismes ne sont pas démontrés et une étude isolée ne fait pas une preuve globale. Les questions ouvertes sont signalées comme telles.%!(EXTRA string=Peptide)